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SEM掃描電鏡樣品制備的基本流程介紹

日期:2024-12-16 11:34:06 瀏覽次數(shù):108

掃描電鏡樣品制備的基本流程是確保獲得高質(zhì)量SEM掃描電鏡圖像的關(guān)鍵步驟。以下是對(duì)該流程的詳細(xì)介紹:

一、準(zhǔn)備階段

明確觀察目的:在開始制樣之前,需要明確掃描電鏡的觀察目的,以便選擇合適的樣品和制樣方法。

準(zhǔn)備工具與材料:準(zhǔn)備好所需的工具,如切割器、磨刀石、導(dǎo)電膠帶、固定劑(如戊二醛、四氧化鋨)、PBS緩沖液、乙醇、乙酸異戊酯等。同時(shí),確保實(shí)驗(yàn)室環(huán)境干凈,避免灰塵等污染物影響樣品質(zhì)量。

掃描電鏡.jpg

二、樣品處理

取材與切割:

對(duì)于塊狀樣品,使用切割器將其切割成合適的大小,通常小于1立方毫米。

對(duì)于粉末樣品,取少量粉末用于制樣,避免過量導(dǎo)致污染或圖像質(zhì)量下降。

固定:

前固定:將樣品放入含有2.5%戊二醛的試管中,固定2小時(shí)以上。

清洗:用PBS緩沖液漂洗樣品3次,每次15分鐘,以去除固定劑。

后固定:將樣品放入含有四氧化鋨的固定液中,固定2~4小時(shí)。

再次清洗:同樣用PBS緩沖液漂洗樣品3次,每次15分鐘。

脫水:

使用不同梯度的乙醇(30%~90%)和乙酸異戊酯進(jìn)行脫水處理。

30%~90%的乙醇依次脫水1次,****乙醇脫水3次,****乙酸異戊酯脫水2次。

干燥:

臨界點(diǎn)干燥:將樣品放入臨界點(diǎn)干燥器中,使用液態(tài)二氧化碳進(jìn)行干燥處理。

干燥完成后,將樣品取出并準(zhǔn)備進(jìn)行下一步處理。

三、導(dǎo)電處理與固定

導(dǎo)電處理:

對(duì)于非導(dǎo)電樣品,需要進(jìn)行導(dǎo)電處理以防止電荷積累影響圖像質(zhì)量。

常用的導(dǎo)電處理方法包括噴涂導(dǎo)電涂層或使用導(dǎo)電膠帶。

固定樣品:

使用導(dǎo)電膠帶將樣品固定在樣品臺(tái)上,確保樣品穩(wěn)定且導(dǎo)電良好。

根據(jù)樣品大小和形狀選擇合適的樣品臺(tái)和固定方式。

四、檢查與調(diào)整

檢查樣品:

在安裝完樣品后,需要對(duì)樣品進(jìn)行Z后的檢查與調(diào)整。

確保樣品無晃動(dòng)、無傾斜,并且與樣品臺(tái)保持良好的導(dǎo)電接觸。

調(diào)整參數(shù):

根據(jù)SEM掃描電鏡的操作手冊(cè)和樣品的特性,調(diào)整掃描電鏡的參數(shù)以獲得Z佳圖像質(zhì)量。

五、注意事項(xiàng)

樣品新鮮度:確保樣品在制備過程中保持新鮮,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露或污染。

無揮發(fā)性物質(zhì):樣品中不應(yīng)含有揮發(fā)性物質(zhì)(如水、油),以免影響圖像質(zhì)量或造成設(shè)備污染。

樣品粘牢:確保樣品在固定過程中粘牢且不易脫落,以避免在掃描過程中產(chǎn)生圖像漂移或損壞設(shè)備。

通過以上步驟,一個(gè)合格的掃描電鏡樣品就準(zhǔn)備好了。正確的制樣流程是獲得高質(zhì)量SEM掃描電鏡圖像的關(guān)鍵,因此科研工作者在操作過程中需嚴(yán)格遵循上述步驟,確保每一步都準(zhǔn)確無誤。

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