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你知道SEM掃描電鏡如何制備含水的樣品嗎?

日期:2024-09-12 09:30:46 瀏覽次數(shù):61

掃描電鏡制備含水樣品的過程相對復(fù)雜,需要特別注意樣品的干燥和導(dǎo)電性處理,以確保在真空環(huán)境下能夠獲得高質(zhì)量的圖像。以下是一個(gè)詳細(xì)的制備流程:

1. 取材與清洗

取材:選擇合適的生物或含水樣品,確保樣品具有代表性且能夠反映所需觀察的特征。

清洗:使用等滲的生理鹽水或緩沖液清洗樣品表面,去除血液、組織液或粘液等附著物,避免這些雜質(zhì)影響觀察結(jié)果。對于難以清洗的樣品,可以采用超聲震蕩或酶消化的方法進(jìn)行處理。

掃描電鏡.jpg

2. 固定

使用適當(dāng)?shù)墓潭▌ㄈ缥於┕潭悠?。固定劑的選擇應(yīng)基于樣品的類型和所需觀察的特征。通常,戊二醛可以交聯(lián)蛋白質(zhì),使樣品更堅(jiān)硬,便于后續(xù)處理。

將樣品浸入固定液中,固定時(shí)間應(yīng)適當(dāng)延長,特別是對于較大的樣品。固定后,用緩沖液清洗樣品,以去除多余的固定劑。

3. 脫水

含水樣品在真空環(huán)境下會放出氣體,導(dǎo)致成像問題。因此,需要通過逐漸用有機(jī)溶劑(如乙醇)替代水的方法將樣品脫水。

常用的脫水過程是梯度脫水,即依次使用不同濃度的乙醇或丙酮(如30%、50%、70%、90%、****)浸泡樣品,每次浸泡一段時(shí)間,直至樣品完全脫水。

4. 干燥

完全去除樣品中的水分以避免在真空環(huán)境下形成水蒸氣。常用的干燥方法包括臨界點(diǎn)干燥和冷凍干燥。

臨界點(diǎn)干燥是一種在超臨界狀態(tài)下(如超臨界二氧化碳)去除樣品中水分的方法,可以*大限度地減少樣品結(jié)構(gòu)的破壞。

冷凍干燥則是將樣品快速冷凍后,在低溫下通過升華的方式去除水分。

5. 導(dǎo)電涂層

為了提高樣品的導(dǎo)電性,避免由于電荷積聚導(dǎo)致成像質(zhì)量下降,需要對樣品進(jìn)行導(dǎo)電涂層處理。

常用的導(dǎo)電涂層材料包括金屬(如金、銀)和碳等。通過濺射或蒸發(fā)等方法將導(dǎo)電材料均勻地涂覆在樣品表面。

6. 安裝與觀察

將制備好的樣品安裝在SEM掃描電鏡樣品支架上,確保樣品穩(wěn)定且易于觀察。

將樣品放入掃描電鏡中進(jìn)行觀察,并根據(jù)需要調(diào)整SEM掃描電鏡的參數(shù)以獲得更好的圖像效果。

注意事項(xiàng)

在整個(gè)制備過程中,需要嚴(yán)格控制每個(gè)步驟的條件,以確保樣品的質(zhì)量。

避免污染和損傷樣品,特別是在清洗、固定和脫水等步驟中。

對于特別敏感的樣品,可能需要采用特殊的處理方法來減少對其結(jié)構(gòu)的破壞。

通過以上步驟,可以制備出適合掃描電鏡觀察的含水樣品,并獲得高質(zhì)量的圖像結(jié)果。

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